时间：2023-08-12 09:16:26
开篇：写作不仅是一种记录，更是一种创造，它让我们能够捕捉那些稍纵即逝的灵感，将它们永久地定格在纸上。下面是小编精心整理的12篇口腔医学技术的发展前景，希望这些内容能成为您创作过程中的良师益友，陪伴您不断探索和进步。
【关键词】口腔修复工艺技术 口腔技工 教育
进入21世纪以来，人们生活水平也在逐步地提高，日益意识到未来的口腔修复工艺技术专业技术人员，必须要具有精湛的修复技术，同时具备扎实的美学知识，才能做出一幅实用的如工艺品般的义齿。中职教育可以说就是培训实用型人才的教育，在今后的口腔修复工艺技术教育中，应采用怎样的教学方法，使将来的口腔修复技工以全新的审美观、价值观，来推动口腔修复工艺技术实践、教学、科研向更高、更快的水平发展，使口腔修复工艺技术教育在新医学模式的背景下，开拓出一个崭新的领域。
一、首先要让学生真正地了解口腔修复工艺技术的发展状况和发展趋势
口腔修复工艺技术教育从招生方面来说，在大部分中职学校暂时还是不容乐观的。从本校几届口腔修复工艺技术班的学生当中了解得知，90%的学生在未来校之前都存在一个误区：认为就读口腔修复工艺技术是可以从事口腔医学工作，可以做口腔医生的，包括一部分家长也是。而到校后发现不同于口腔医学，就有一部分人选择了其他专业，少部分人留了下来。所以，首先要让学生具备一定的专业知识，要先熟悉这个行业是做什么，怎么做？必须先让他成为本专业的内行人，这样他才可以以内行的身份和这个行业的人交流沟通，否则他无法与你沟通，你跟他讲什么他根本不明白。只有具备了一定的专业知识，他才可以知道和了解这个行业的发展状况和发展趋势，才能够真正地了解口腔修复工艺技术也是一门不错的专业，它也有它的优势，它也有它的发展前景。为了加强了解，学校可以与相关的义齿加工厂合作，组织学生到加工厂去参观，去真正了解口腔修复技工是做什么的。
二、要注重培养学生对本专业的兴趣
我们都知道“兴趣是最好的老师”。作为一名口腔修复工艺技术学生，将来要想成为一名出色的口腔修复技工，当然要对本行业充满浓厚的兴趣。来到学校后，许多同学都会逐渐地对学习、在学校的学习产生厌恶感，他们认为在学校学的知识很枯燥，没有意思。现在，我们要告诉他们应该转变自己的观念，重新寻找并发现学习中的乐趣，要树立起学习的兴趣。我们在学习时，应该尽量去想有趣的方面，而不是去想枯燥的方面。遇事都去想它的好处，这样就会发现学习以及很多其他事情都是有趣的。学会发现学习中的乐趣，这样就会学得更好。请记住：大千世界，乐趣无处不在。那如何让学生喜欢上口腔修复工艺技术，在教学过程中就要想尽办法了。本人已从事口腔修复工艺技术教学十年了，从教学过程中对学生的观察，学生的兴趣更倾向于实践操作。所以，在教学中，教师应该对教学大纲中一些不合理的安排根据自身的实际情况，作出适当的调整，让学生能够较多的时间投入到实操训练中，在培养兴趣中同时也不断提高自己的技术水平。同时，我们老师也可以在本班内定期地开展一些关于口腔技工类的比赛，如雕刻牙齿，全口义齿排牙等，让学生去相互点评，老师总结，以此来提高学生的学习积极性，促使学生主动地去学习。现在我校近两年还加强了与珠三角一些义齿加工厂的合作，这些加工厂每学期会带来一些相关的器械、工作服装赠送给学生，同时会宣传本企业的发展及当代口腔技术的新进展，相应地也提高了同学们的学习兴趣。
三、加强课程、教学模式改革
当代的中职教育，要着眼于培养学生的创新能力，突破学科体系的框架，把工作过程知识作为职业教育的核心，把典型的工作任务作为工作过程中知识的载体，并按照职业能力发展规律构建教学内容，培养学生职业能力。工学结合，带薪实习，实行在校一年半，实习一年半的人才培养模式，通过学生在加工厂的顶岗带薪实习，并允许在不同的岗位轮转，培养学生综合分析问题并能胜任该职务的能力。同时还可与相关企业开展“订单式”的人才培养模式，促进学生的就业，也相应地促进了学生对本专业就业前景的认知度。我校现已实行该模式，在校理论学习一年半，企业实习一年半，实习期间企业给予劳动报酬，毕业后可留在企业工作。从近两年我校实施的情况来看，学生对该模式还是比较认可的，不用担心读书几年找不到工作，也相应地减轻了学生家庭的经济负担。
四、加强实训设备投入 提升专业建设质量
学校如果实训设备投入不足，没有完善的实验室，实验器材缺乏，相应地在校学习期间学生就不能得到很好的技能训练，动手操作能力也会不足，可能会导致学生的学习兴趣不足，同时学生进入相关企业临床实习时也会因为在校没学到相应的知识而力不从心，造成不良后果。我校由于处于粤北山区，经济条件相对落后，政府没有投入，导致本校的一些实训设备还相对比较落后，有的甚至是已接近于淘汰的产品，从而影响了本校该专业的学生的学习，本校在与珠三角相关的学校对比中，近几年在招生情况、招生的学生学习积极性及设备投入、师资等方面都相对落后，所以本校的口腔修复工艺技术专业的发展还是受到了一定的障碍。
总之，在高速发展的当今社会，国内高质量的口腔相关医疗行业的需求也在日益增长，口腔修复工艺技术也必将会成为热门行业，因此，培养适用的、高效的技能性人才也非常重要。
【参考文献】
1材料和方法
1.1 一般资料：随机选取本院口腔正畸科患者39例（男13例，女26例），年龄18～37岁，平均25.1岁。患者的入选标准为双牙弓严重前突21例；牙前区牙列III度以上拥挤18例。所有患者均没有正畸治疗史，没有系统性疾病，并且口腔的卫生较好。病例的排除标准为面型前突不严重；牙齿II度拥挤，面型表现不明显；患者口腔卫生差。
1.2 治疗方法：所有正畸患者的治疗均选用直丝弓矫治器（长沙天美齿科公司），微型种植体支抗自攻型微钦钉及专用起子（慈溪市慈北口腔器械有限公司）。对于双颌前突严重的患者，先拔除其第1前磨牙，然后行直丝弓矫正治疗，使牙列排列整齐。行关闭拔牙间隙的前1个月内将支抗种植体植入备用，支抗种植体的植入一般位于上颌第一臼齿和尖牙牙根间的牙槽骨。若患者需要压低前牙，则先行直丝弓矫治技术，使牙列排齐整平，植入上颌中切牙和侧切牙之间。
植入微型自攻型钛钉：先将植入部位明显标记，拍摄全景片、侧位片和根尖片，检查患者牙根形态及位置。种植体在植入之前，需进行局部麻醉，麻醉深度不需达到齿槽，麻醉软组织即可。自攻型螺钉可以通过患者的牙龈直接植入骨内，既简化手术过程，又减少手术创伤。如果患者的植入部位被牙槽粘膜所覆盖，则需要行3～5mm纵行切口。在完成支抗以后，以植入工具套住种植体头部，将其与植入相反的方向旋出。微型种植体在取出时，不需要麻醉，植入体在短期内可得到良好愈合。
1.3 疗效评价：测定微型种植体支抗的疗效，主要从患者上下颌骨变化（SNA、SNB、ANB、Z/Angle）和上下颌牙齿变化（OB、OJ、U1/L1、U1/SN、L1/MP）特征，并应用配对样本t检验比较疗效的显著性，分析过程由SPSS软件完成，显著性水平设置为0.05。
2结果
经过约20个月的治疗，所有正畸患者均对微种植体表现出良好的耐受性，微种植体本身比较稳定，微种植体部位处的软组织有轻度的水肿，患者没有感染或炎症发生，也没有明显的不适感。矫治结束以后，患者的面型良好，牙列整齐，形成尖窝状交错，没有牙合干扰或功能障碍。患者和家长对矫正治疗后面型比较满意，医患双方对治疗结果均满意。疗效统计结果见表1～2。
3讨论
种植体支抗具有以下优点：体积微小、操作简单、创伤较小、支抗作用持续稳定，并且容易被患者所接受和认可[4]。研究表明，持续稳定的牵引力能够更加有效地、更加快捷地使正畸牙健康移动。然而，微型种植体正畸支抗治疗过程中仍需要注意以下问题：①尽管微型种植体的体积微小，操作简洁，并且较传统的种植体稳定性更好。但该技术仍然是具有创伤性，并且对患者形成心理影响。在口腔正畸科室内，诊治的对象以儿童为主，一般会对手术存在抵制和恐惧，因此对手术的进程和完成提出更高层次的要求；②微型种植体支抗在应用过程中，仍然存在引发并发症的可能，比如使患者的牙根造成损伤，通常情况下，牙根间距很小，治疗操作过程中，很有可能会伤到牙根，使患者的咬合发生不适，甚至会引发感染，以及种植体的松动；或者患者的豁膜受到刺激，会造成感染和炎性反应，致使患者的植入部位发生肿胀和疼痛；又或者是微型种植体在移动时，会伤及周围的组织结构，如神经或血管。因此，种植体部位的选择至关重要，要尽量远离神经和血管，以及敏感的组织器官[5]。
微型种植体如果要保持长期稳定，必须与临近的组织器官和骨质有很好的结合。较长的种植体能够增加其与骨的接触，有利于增加种植体的抗载荷能力，从而更加有利于种植体的稳定和治疗效果。如果患者颌骨的结构允许，医师应该选择较长的种植体作为正畸支抗。微型种植体支抗为口腔正畸提供崭新的治疗手段，为口腔正畸的设计和矫治带来重大的进展。需要强调的是，微型种植体支抗的应用仍于刚刚起步，在技术上还存在不足，因此需要进一步发展和完善[6]。此外，患者在接受种植体支抗治疗需要一个过程，因此，如何改善患者的心理状态，及其对种植体支抗的心理承受能力，将是医务人员工作和努力的方向。随着医学研究和临床技术的进一步发展和完善，微型种植体支抗技术的发展前景将更加广阔和光明。
[参考文献]
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[2]邓卓峰，毛 靖，李 平，等.正崎微型种植体支抗稳定性的临床研究[J].临床口腔医学杂志，2006，2(3)：305.
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[6]郭邑隆.国产微型自攻钦钉种植体支抗在正畸临床中的初步应用研究[J].包头医学院学报，2006，21(5)：170.
(云南新兴职业学院）【摘要】 生物制药就是借助生物工程来合成制备有药物活性的生物制品并应用于制药工业的技术和过程，有时特指利用转基因动植物活体作为生物反应器生产药物。随着科技的发展，生物制药工业是生物工程应用研发中最活跃和进展最快的领域，已经成为世纪最具前途的产业之一。21世纪被称为生物世纪，世界上许多国家都不断加大对生物制药工业的政策扶持与资金投入,把生物制药工业作为优先发展的战略性产业之一。生物制药专业人才就业前景被看好。【关键词】生物制药；就业方向；就业前景【中国分类号】F416.7【文献标识码】A【文章编号】1004-5511（2012）04-0621-01 医药行业被称为“永不衰落的朝阳产业”，它包括医药工业和医药商业，其中医药工业按原材料来分，又可分为化学制药业、中药业、生物制药业及医疗器械业。而其中作为新兴产业的生物制药业更是被称为“朝阳产业中的朝阳产业”，那么生物制药专业的就业形势如何呢？是否跟生物制药产业一样是永远朝气蓬勃？近年社会对医科类毕业生的需求有不同的倾向，临床医学类人才有走俏的趋势，从事老人医学、保健医师、家庭护士、康复理疗、男性护士等职业的人才也将逐渐成为热门，而预防医学、口腔医学专业从理论上是有前途的，但从近几年就业状况看，却是比较困难，基础医学类与护理学类专业就业也不太理想。不同的是，药科类毕业生的就业前景普遍看好，总体上是供不应求，各医药公司、制药厂是吸收这类毕业生的大户，制药业对人才的需求是稳中有升，另外，医药界的贸易、经销、检验和医药信息管理等专业对技术人员的需求也将会增加。总理在题为《让科技引领中国可持续发展》的讲话中指出，要运用生命科学推动农业和医药产业发展。积极发展转基因育种技术，突破创新药物和基本医疗器械关键核心技术，形成以创新药物研发和先进医疗设备制造为龙头的医药研发产业链条。透过温总理的讲话，我认为生物制药行业有着广阔的发展前景，可能会成为未来国内经济的一个重要增长点。
21世纪是生命科学大发展的世纪。生物科技发展将显著提高农业和人口健康水平。13亿中国人的吃饭问题必须靠自己来解决，根本要靠科技。要发展转基因育种技术，这是提高农业产量和改善产品质量的重要途径。科学家建议超前部署分子设计育种，大规模挖掘动植物种质中蕴藏的优异基因资源。健康科技、生物医药事关民生大计。要把生命科学前沿、高新技术手段与传统医学优势结合起来，研发适应多发性疾病和新发传染病防治要求的创新药物，突破应用面广、需求量大的基本医疗器械关键核心技术，形成以创新药物研发和先进医疗设备制造为龙头的医药研发产业链，大幅度提升生物医药产业的国际竞争力。2012生物制药获政策扶持，人才就业前景大好：一、2012年，生物制药领域频发喜报，医药行业生物制药自主研发受到国家多项政策大力扶持，企业人才招聘需求急剧攀升，而现有人才供给能力明显不足。二、生物制药获得国家大力支持：2012年1月4日，科技部了《国家中长期生物技术人才发展规划（2010-2020年）》，明确提出了涵盖生物医药在内的人才培养计划。该《计划》指出，到2020年，我国要培养和造就3-5名国际顶尖科学家，力争在生物医药、生物农业、生物制造、生物能源、生物环保和相关管理领域培养造就一批领军人才和学科骨干；到2020年，力争培养和造就领军人才300-500名、学科骨干3-5万名；力争培养和造就30万名生物产业人才；力争培养和造就3000-5000名生物技术高级管理人才。国家对生物技术的如此大手笔人才培养计划让企业信心十足。三、人才供不应求：从英才网联旗下医药英才网的最新统计数据显示，截至2012年1月1日，医药行业生物技术、基因研究、蛋白质研发、生物制药中高级管理等职位的人才招聘需求全年同比增长117.5%，增幅火爆翻番。而医药行业生物技术研发人才的全年招聘需求同比增长121.7%，增幅超过行业总体增长水平。从数据上可以明显看出，医药企业对生物技术研发人才的迫切需求。而截至2012年1月1日，医药行业整体求职者增幅仅为24.5%，增长活跃度与企业招聘需求相比黯然失色。英才网联就业指导专家指出，今年国家提出对生物制药领域的多项支持是符合客观发展环境的。目前，国际上的生物制药领域发展快速而高端，而我国在这方面还处于起步阶段，基本药物的“原创作品”也甚少，从国家需求上看，我国的生物制药还有很大发展空间，因此，该类人才必将受到火爆追捧，就业前景也毋庸置疑。生物制药专业的毕业生主要有四个就业方向：
方向一：工业、医药、食品、环保等行业的企事业单位和行政管理部门的研发人员或技术员。该方向按照待遇及工作环境从高到低可分为以下几类： 1.跨国公司或较大的生物技术外企的技术支持；2.公务员或事业单位的检验员；3.生物技术服务公司或非事业型科研单位；4.生物制药厂、酒厂、疫苗公司等企业的技术人员。 方向二：大中专院校及其他教学单位的教师。由于目前的高校都向综合性大学的方向发展，因此高校对生物学教师的需求也有所增加。但高校对学历的要求较高，硕士毕业要想进一线城市的院校或重点大学有一定的困难。方向三：继续深造或出国。很多人是出于对生物制药的热爱而非功利性目的选择学习这个专业的，毕业时他们并不愿意放弃所学投身其他行业。要想成为生物制药领域的精英，必须具备很强的科研能力，因此他们当中很多人选择了考研，而研究生毕业时，考博或出国又成了他们继续深造的途径。方向四：转向销售、管理等行业。销售、管理类职位的门槛比较低，沟通能力、耐心和毅力是必备的素质。与其他职业相比，销售、管理具有更广阔的成长空间。对于他们来说，进入生产生物制剂、生物器材等产品的企业做销售、管理也称得上是学有所用。总体来看，具有将生物、医学与工程技术相结合的综合性生物制药专业人才就业前景被看好。这类人才需具备两方面技能：其一是新品研发，其二是仪器操作。生物医学工程领域、生物技术领域、生物信息领域、医疗卫生部门等相关单位对该类人才都有强大的需求。但目前国内限于专用设备，以及相应产品开发不够，就业还不太理想，大部分学生准备进一步深造或是投入到与制药行业相关的工作中。参考文献［1］文淑美. 全球生物制药产业发展态势;中国生物工程杂志, 2007,27(7): 117-121［2］李玉彬,钱晓璐,生物制药产业发展现状与趋势 - 现代农业科技,2010 年第 15 期
[关键词] 头颈癌； 量子点； 表皮生长因子受体； 成像； 体内分布
[中图分类号] R 739.8 [文献标志码] A [doi] 10.3969/j.issn.1000-1182.2012.06.003
对活体内癌细胞可视化实时成像观察在研究癌症的发生发展和个体化治疗中具有重要作用，同时也是抗癌领域里研究的难点和热点。近年来发展起来的量子点（quantum dots，QDs）在该领域显示出巨
大的发展前景[1-2]。
QDs是一种由Ⅱ～Ⅵ族元素或Ⅲ～Ⅴ族元素组成的纳米微晶体，与目前传统的有机荧光染料和荧光蛋白相比，QDs具有如下独特的光学特性：QDs激发光谱宽且连续分布，发射光谱窄而对称，荧光度强，光化学稳定性好，不易发生光漂白，通过改变粒子的尺寸和组成可获得从紫外到近红外范围内任意点的光谱[1-3]。QDs的这些光学特征是目前所有荧光探
针都不具备的。特别是近年来发展起来的发射波长在700～900 nm范围内的近红外荧光量子点（near-infrared fluorescent quantum dots，NIRF-QDs），其不仅可以避免组织自发荧光（400～600 nm）的干扰，同时对组织具有强的穿透力，因而特别适合于体内可视化成像研究[4-5]。
目前研究表明：头颈部鳞状细胞癌细胞高表达表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，
EGFR）[6-7]。本研究将人颊鳞状细胞癌BcaCD885细胞植入裸鼠的颏-颈交界部皮下，建立颏-颈部鳞癌模型，用最大发射波长为800 nm的QDs与EGFR单克隆抗体（monoclonal antibody，mAb）连接，制备QD800-EGFR mAb探针，通过静脉注射QD800-EGFR mAb对头颈部鳞状细胞癌进行原位可视化成像观察，并观察其体内分布特征，为进一步探索基于抗体靶向性的NIRF-QDs对头颈部鳞状细胞癌的可视化成像和个体化诊治提供依据。
1 材料和方法
1.1 主要材料
1.1.1 试剂和仪器 QD800抗体偶联试剂盒（Invitro-
gen公司，美国），EGFR mAb（Abcam公司，英国），人颊鳞状细胞癌细胞株BcaCD885（四川大学口腔疾
病研究国家重点实验室），紫外分光光度计（DU600，Beckman公司，美国），冷冻离心机（Z233MK-2，
HERMLE公司，德国），激光扫描共聚焦显微镜（la-ser scanning confocal microscope，LSCM）（TCS-SP5，Leica公司，德国），Maestro活体成像系统（Maestro EX，Cri公司，美国）。
1.1.2 实验动物 选取重庆医科大学实验动物中心提供的SPF级BALB/c nu/nu裸鼠12只为研究对象，鼠龄6～8周，体重20～25 g。恒温恒湿条件下饲养，垫料、饲料和饮水均经灭菌处理。所有实验操作程序均经过重庆医科大学实验动物研究所实验动物使用管理委员会批准。
1.2 方法
1.2.1 QD800-EGFR mAb探针的制备和纯化 根据QD800抗体偶联试剂盒中实验手册所提供的实验步
骤来进行QD800-EGFR mAb探针的制备，本实验分为4步，具体如下。1）QDs的活化和洗脱：将浓度为
10 mmol·L-1的双功能SMCC溶液14 μL以及浓度为
4 μmol·L-1的QD800液125 μL混合，在室温下活化1 h后用脱盐柱洗脱，收集有色洗脱液500 μL备用。2）抗体还原和分离：将浓度为1 mol·L-1的二硫苏糖醇液体6.1 μL加入到300 μL浓度为1 mg·mL-1的EGFR单抗PBS液中，室温下还原反应30 min后加入染料指示液，用脱盐柱洗脱，收集着色液500 μL备用。3）偶联和灭活：将收集的以上两种洗脱液混合，室温下偶联反应1 h后加入3 μL浓度为10 mmol·L-1的2-巯基乙醇，室温下灭活反应30 min。4）浓缩和纯化：将以上偶联灭活后的液体加入超滤装置管中7 000 r·min-1离心15 min，收集超滤离心膜内侧偶联溶液，然后用Pierce柱行色谱分离，得纯化的QD800-EGFR mAb探针。最后根据产品说明书提供的消光系数和测量波长两个参数，以及以此波长作为激发光在紫外分光光度计中测出相对应的吸光度和比色杯的光程，计算出QD800-EGFR mAb探针的浓度。计算公式为：A=εcl，其中A为吸光度值，ε为消光系数，c为分子浓度，l为光程。
1.2.2 QD800-EGFR mAb探针体外标记BcaCD885活细胞 将生长良好的BcaCD885细胞以每毫升5×104个的浓度接种到9个35 mm玻璃底培养皿（直径为15 mm）中，每个1 mL，培养24 h后，弃去培养基，PBS清洗3次。然后分为3组，每组3个培养皿。实验组加入浓度为100 nmol·L-1的QD800-EGFR mAb探针100 μL；对照组Ⅰ加入100 μL浓度为100 nmol·L-1的QD800；对照组Ⅱ先加入浓度为1 μg·mL-1的EGFR mAb 200 μL以封闭EGFR，2 h后用PBS清洗3次，然后加入浓度为100 nmol·L-1的QD800-EGFR mAb探针100 μL。以上各组在37 ℃下孵育30 min后用PBS冲洗3次，然后在LSCM下观察QD800-EGFR mAb探针标记BcaCD885细胞的情况。
1.2.3 裸鼠头颈鳞状细胞癌模型的建立 取对数生长期的BcaCD885细胞，采用0.5%胰蛋白酶进行消化，在4 ℃下，800 r·min-1离心4 min，然后将BcaCD885细胞悬于PBS液中，将含有2×106个BcaCD885细胞的PBS悬液0.2 mL注射于12只裸鼠的颏-颈交界部皮下，从而建立了头颈部鳞状细胞癌模型，每日观察肿瘤的生长情况，待肿瘤的最大径达到0.8～1.0 cm时开始实验。
1.2.4 肿瘤活体可视化成像观察 将头颈部鳞状细胞癌模型裸鼠分为实验组和对照组，每组6只，用2%戊巴比妥钠（40 mg·kg-1）行腹腔注射麻醉后，实验组通过尾静脉注射100 μL的QD800-EGFR mAb探针
（含100 pmol当量的QD800）。对照组通过尾静脉注射250 μL浓度为1 mg·mL-1的EGFR mAb，24 h后再注射100 pmol当量的QD800-EGFR mAb探针100 μL。所
有动物于注射QD800-EGFR mAb探针之后15 min、30 min、1 h、3 h、6 h、9 h、24 h的7个不同时间点用Maestro活体成像系统进行可视化成像检测，激发光/发射光为630 nm/800 nm，曝光时间为50 ms，像素为1 024×1 024。将采集的图像用Maestro 2.10.0软件进行处理和数据分析，分别显示自发荧光和目标荧光信号，然后测量其荧光值，并且计算荧光信噪比，即肿瘤荧光强度与背景自发荧光强度之比。将每种信号添加伪色彩，本研究将自发荧光设置为绿色，目标荧光信号设置为红色，最后将两种色彩相叠加。
1.2.5 QD800-EGFR mAb荧光探针的体内分布和器官的组织检查 实验组和对照组分别在3 h成像完毕后断颈处死裸鼠3只，24 h成像后处死裸鼠3只，解剖取出裸鼠的肿瘤、心、肝、脾、肺、左肾、右肾、脑、肠、胃，各器官用PBS冲洗后切分为2块，一块器官组织称重后剪成小碎片，放入玻璃匀浆器内匀浆，取各器官匀浆液100 μL放入96孔培养板内，用Maestro活体成像系统进行成像，根据各器官匀浆液的平均荧光和各器官重量对各器官内QD800荧光行半定量分析。同时将各器官另一块组织用冰冻切片包埋剂包埋并速冻，在-20 ℃下连续切割为7 μm厚的组织切片，每两张连续的冰冻切片中，一张行常规HE染色，另一张冰冻组织切片在LSCM下观察QD800在组织中的分布情况。
1.3 统计学分析
采用SPSS 13.0软件对实验数据进行分析，实验结果以x±s表示，对两均数间比较采用t检验，对3个均数以上间的比较采用方差分析，P
2 结果
2.1 QD800-EGFR mAb探针的制备和纯化
收集纯化的QD800-EGFR mAb探针样本，按照产品说明书上提供的在550 nm下的消光系数ε550=1.7×106（mol·L-1）-1cm-1，以及在550 nm下测得的A为
3.442，l=1 cm，计算得到最终纯化的QD800-EGFR mAb探针浓度为2.025 μmol·L-1。
2.2 QD800-EGFR mAb探针体外标记BcaCD885活
细胞
在LSCM下，实验组BcaCD885细胞膜上可见明显的QD800红色荧光，对照组Ⅰ和对照组Ⅱ的BcaCD885细胞均未观察到QD800的荧光（图1）。
2.3 肿瘤活体可视化成像
裸鼠颏-颈交界处皮下接种BcaCD885细胞1周后即可见明显的肿瘤生长，12只裸鼠全部成瘤。3周后肿瘤最大直径达到0.8～1.0 cm时开始实验。实验组在尾静脉注射QD800-EGFR mAb探针15 min后肿瘤部位出现明显的荧光信号，30 min～6 h时肿瘤的荧光信号最完整，与肿瘤大小对应，在9 h时观察到肿瘤的荧光成像明显变小，24 h时只有很小的荧光成像（图2）。30 min～6 h时实验组荧光信噪比较高，9 h时荧光信噪比明显降低，24 h时荧光信噪比接近基线水平（图3）。对照组只在15 min时肿瘤部位可检测到微弱荧光信号，可能是BcaCD885癌细胞对QD800-EGFR mAb非特异性吞噬所导致，但30 min～24 h时未检测到明显区别于背景荧光的荧光信号（图2、3）。实验组和对照组裸鼠肝脾相对应的部位在静脉注射QD800-EGFR mAb探针后15 min可见明显的荧光信号，一直持续到24 h（图2）。
2.4 QD800-EGFR mAb探针的体内分布和器官的组
织检查
在3 h和24 h实验组和对照组成像完毕后，在光镜下观察肿瘤的HE染色切片均可见大量癌细胞，显示肿瘤生长良好（图4）。在LSCM下观察肿瘤和各器官的冰冻组织切片可见：3 h时实验组和对照组的肝、脾组织以及实验组肿瘤中均有大量QD800聚集，左右肾组织中可见有散在QD800。在24 h时实验组和对照组的肝、脾组织中有大量QD800聚集，左右肾组
织和实验组肿瘤中可见有散在QD800（图5）。在3 h和24 h时实验组和对照组的心、脑、肠、肺、胃和对照组肿瘤中均未见有明显的QD800（图5）。
cinoma
在3 h和24 h各器官组织匀浆的荧光半定量分析结果见图6。由图6可见，在3 h和24 h时实验组和对照组肝中QD800的平均荧光均最高，显著高于其他器官（P
均荧光在实验组和对照组中差异无统计学意义（P>
0.05）。
3 讨论
目前对癌症成像检测较好的方法如CT、MRI等传统方法均不适合临床医师在术中对癌细胞进行实时可视化检查。近年来基于纳米技术发展起来的NIRF-QDs在对体内癌细胞的直接可视化成像检测显示出巨大的发展前景[1-5]。表面生物功能化的QDs标记活
细胞后，在实验检测所需浓度范围内对细胞没有毒性，不影响活细胞的生长、增殖、凋亡和分化[3，8-10]。由于NIRF-QDs具有独特的光学性质，同时QDs作为纳米粒还具有易于表面修饰连接和易于穿透肿瘤新生血管到达癌细胞的性质，因此，QDs在癌症个体化手术治疗方面显示出独一无二的优势[3-10]。
本研究体外结果表明：QD800不能与BcaCD885细胞结合，QD800-EGFR mAb探针能与BcaCD885细胞结合，但不能够与被EGFR mAb封闭EGFR后的BcaCD885细胞结合，这就证明了mAb与QD800连接后，EGFR mAb的免疫活性没有改变，QD800-EGFR mAb探针能通过特异性免疫识别BcaCD885细胞表达
的EGFR，从而使QD800结合到细胞表面。
笔者选择高表达EGFR的BcaCD885细胞移植于头颈部进行活体可视化成像研究，主要是因为：1）纳米粒QDs进入血液后易被体内的单核吞噬系统细胞作为异物识别而吞噬，从而大量聚集于含单核吞噬系统细胞丰富的肝脾等器官，这对躯体部肿瘤的成像产生很大的干扰，但对头颈部的成像无干扰，因此头颈部是QDs可视化成像较理想的部位；2）各种靶向性探针经静脉注射后对肿瘤的靶向性本身与肿瘤的生长部位也密切相关；3）头颈部恶性肿瘤大多为鳞状细胞癌，而90%以上的头颈部鳞状细胞癌细胞高表达EGFR[6-7]，以EGFR为靶点用QDs进行可视化
成像对头颈部鳞状细胞癌具有广泛的适用性。
本研究基于头颈部鳞状细胞癌高表达EGFR为靶点，用静脉途径注射QD800-EGFR mAb探针，检查表明：QD800-EGFR mAb在体内能通过EGFR mAb作为桥梁对表达EGFR的BcaCD885细胞靶向结合，即QD800的荧光能代表BcaCD885细胞的存在，QD800与细胞结合后的荧光在体外能够清楚可见。本研究中在注射QD800-EGFR mAb探针15 min后能够看到清楚的成像，但在30 min能检测到较15 min荧光度更高和更完整的肿瘤成像，这种高荧光度能完整显示肿瘤的成像，但是30 min～6 h无明显变化，在9 h时肿瘤成像明显变小，荧光度也明显减低，提示用QD800-EGFR mAb探针行头颈部鳞状细胞癌个体化成像检测的最佳时间为静脉注射QD800-EGFR mAb探针后30 min～6 h这一时间段内，随着时间的推移，在24 h时肿瘤成像进一步变小，荧光度也更低。
前期研究也表明：在皮肤屏障存在的情况下，QD800标记癌细胞后能可视化成像检测到104个癌细胞，比目前的CT和MRI对最小癌灶检测的敏感性提高了100倍，但如果在实际手术中，由于肿瘤暴露在开放的创面下，其检测的敏感性将会进一步提高[11]。Gao等[12]预测NIRF-QDs标记癌细胞后能可视化检测
到10～100个细胞的水平。随着更高质量、更强组织穿透力QDs的合成和光学成像技术的不断发展，在暴露的创面下QDs对癌细胞的可视化成像检测有望达到单个细胞水平，以后临床医师只需佩带一个很小的激发光源探头和近红外光接受器，就可在手术中对肿瘤进行真正“量体裁衣”的个体化手术切除。
目前对QD800-EGFR mAb探针进入体内后的代谢过程还不清楚，本研究结果可见：静脉注射QD800-EGFR mAb探针后15 min～24 h，肝脾相应部位均显示出清楚的成像，提示肝、脾内一直有大量QD800聚集。在注射QD800-EGFR mAb探针3 h和24 h后，QD800在肝、脾组织中分布最多，其次是肾，而心、脑、肠、肺、胃和对照组肿瘤中均未见有明显QD800分布，但在3 h时实验组肿瘤中QD800显著高于24 h时。
本研究结果表明：QD800-EGFR mAb探针静脉注射后对高表达EGFR的头颈鳞状细胞癌能进行清楚的可视化个体成像检测，在非侵入可视化成像研究头颈鳞状细胞癌的发生发展和个体化治疗等方面有着巨大的发展前景。但QD800-EGFR mAb探针进入体内后在肝、脾组织中大量聚集。如何减少QD800-EGFR mAb探针进入体内后在肝、脾组织中聚集，以及研究如何代谢和清除是今后研究的重要方向。
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