作者:郑红云; 申复进; 童永清; 李艳蛋白磷酸酯酶2a海马神经元轴突干扰rna转染
摘要:目的 探讨基因水平下调PP2A对胎鼠海马神经元轴突生成的影响.方法 选取体外培养原代海马神经元为研究模型,首先构建PP2A催化亚基特异性干扰RNA及其对照(si-PP2A/ssi-PP2A)质粒,选择在种植前下调PP2A水平,观察其对海马神经元轴突生成是否有作用;原代细胞采用Amaxa大鼠神经元核电转试剂盒分别转染EGFP-ssiPP2Ac和EGFP-siPP2Ac,神经元种植培养48 h后固定做免疫荧光双标,分别标记轴突特异性标记物Tau-1和树突特异性标记物MAP-2,观察基因下调PP2A水平对神经元轴突生成的影响.结果 原代海马神经元转染48 h后对照转染组海马神经元神经元轴突和树突均已形成,而干扰RNA转染组神经元轴突生长受到显著抑制,而树突生长未受到明显影响;si-PP2A转染组(干扰转染组)神经元轴突长度仅为对照转染组的38%,单个神经元的平均轴突数目也从正常1.0/neuron下降到0.5/neuron.结论 基因下调PP2A水平显著抑制了原代海马神经元轴突生成,结合前期药物下调研究结果提示维持细胞内正常PP2A水平在海马神经元轴突生成中起重要作用.
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社