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人胚胎干细胞神经分化过程中VEGF作用机制的研究

作者:焦淑洁; 许慧芳; 张苏明; 许杰; 湛延强人胚胎干细胞神经干细胞神经分化血管内皮生长因子notch信号通路

摘要:目的观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对人胚胎干细胞分化为神经元的促进作用是否与Notch信号通路有关。方法人胚胎干细胞经拟胚体向神经元分化,并分为3组:A组为常规诱导组;B组为常规诱导+VEGF(10ng/ml)作用组;C组为常规诱导+γ-分泌酶抑制剂预处理+VEGF(10ng/ml)作用组。用免疫荧光法检测及计算各组不同阶段细胞阳性率,半定量RT-PCR观察各组神经干细胞Hes1 mRNA表达,MTT法检测3组神经干细胞增殖速率。结果免疫荧光法检测显示,B组产生神经干细胞的阳性率明显高于A、C两组,差异有统计学意义(P〈0.01),A、C两组之间无显著性差异(P〉0.05);B、C两组进一步分化为神经元的阳性率均明显高于A组,差异有统计学意义(P〈0.01),B、C两组之间无显著性差异(P〉0.05);半定量RT-PCR观察显示B组神经干细胞Hes1 mRNA表达明显高于A、C两组;MTT法检测与半定量RT-PCR结果相似。结论人胚胎干细胞体外分化过程中血管内皮生长因子通过激活Notch信号通路,促进神经干细胞增殖,而VEGF在神经干细胞向神经元分化中的作用与Notch通路无关。

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卒中与神经疾病

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