作者：周竹娟; 郑健; 徐炎神经元细胞核核移植
摘要：目的 建立制备皮质神经元细胞核的方法，以便用于核移植研究。方法 （1）采用胎龄17d的胎鼠进行皮质神经元的分离培养，用抗MAP2和NeuN免疫细胞化学法进行鉴定；（2）用梯度离心法制备神经元细胞核，并用HE染色、免疫荧光染色、透射电镜检查等方法进行鉴定，用台盼蓝染色检测其活性。结果 （1）胎鼠皮质神经元呈多角形，伸出多个突起，MAP2染色显示神经元细胞浆和突起呈免疫反应阳性，NeuN染色显示神经元细胞核呈免疫反应阳性，部分核周胞质和部分近端突起也呈免疫反应阳性，MAP2和NeuN阳性细胞比例均在90％左右；（2）HE染色和Hoechst33342免疫荧光染色显示神经元梯度离心后在22％～30％Ficoll400梯度层可见到大量圆点状细胞核，台盼蓝染色显示活细胞核比例为99．6％；在22％～30％Ficoll400梯度层细胞透射电镜标本中可观察到圆形的细胞核，在细胞核的周围仅见到一层薄薄的胞浆成分。结论 梯度离心法是制备皮质神经元细胞核的可靠方法。
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