作者：周竹娟; 郑健大脑皮质神经元胚胎微管相关蛋白
摘要：目的 探讨胎鼠皮质神经元分离和培养的方法,并对分离得到的细胞进行鉴定.方法 分离17 d胎鼠大脑皮质,切碎后经0.3%胰蛋白酶和DNaseI消化得到细胞悬液,用含N1添加剂和10%胎牛血清的MEM培养基进行培养,相差显微镜下观察神经元的生长情况.培养第3和6 d以微管相关蛋白-2（MAP-2）和神经元核心抗原（NeuN）为标志物,用免疫细胞化学的方法对分离培养的细胞进行鉴定.结果 培养第5～6 h时神经元已贴壁,长出数个小突起,培养第3 d可见突起增多、延长,培养第6 d细胞突起明显延长,相邻细胞的突起交错形成网络 培养第3 d MAP2免疫反应阳性细胞率（87.5±3.5）%,与培养第6 d的阳性细胞率（90.2±5.1）%无明显差异（P＞0.05） 培养第3 d NeuN免疫反应阳性细胞率（92.4±2.7）%,与培养第6 d的阳性细胞率（88.7±4.6）%无明显差异（P＞0.05）.结论 本方法分离培养的神经元纯度高,在含N1的完全培养基中培养神经元存活状态良好,未见胶质细胞明显增生.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
