作者：王长江; 沈志强; 金婷婷; 武曰星; 刘慧; ...犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子原核表达免疫调节
摘要：通过原核系统表达犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子（NcMIF）,并对该蛋白的免疫调节作用进行分析。根据Gen Bank发表的序列,利用分子生物学软件设计了一对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增出NcMIF全基因,经测序分析后,将NcMIF亚克隆到原核表达载体p ET28a（＋）,然后将鉴定为阳性的重组质粒转化到E.coli BL21（DE3）中用IPTG进行诱导表达。利用HPLC对可溶性表达的重组NcMIF蛋白进行纯化,去除内毒素,最后对NcMIF的免疫调节作用进行鉴定。结果显示,NcMIF没有明显的抗糖皮质激素的免疫抑制作用,也没有上调巨噬细胞TNF-α和NO表达量的作用,为进一步探究NcMIF的生物学功能及MIF在宿主免疫调节中的作用奠定了基础。
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