作者：李建; 张磊; 张媛; 彭国瑞; 王秀丽; 刘博...大肠埃希氏菌胸膜肺炎放线杆菌穿梭载体
摘要：合成胸膜肺炎放线杆菌质粒pKMA2425上长度为126bp及2214bp的2个DN段，克隆到大肠埃希氏菌质粒pGSI中，获得重组质粒pGSIA。PCR扩增pTKRED上的大观霉素抗性基因及线性化的pGSIA（126bpDN段-pGSI-2214bpDN段），连接，电转化胸膜肺炎放线杆菌。在大观霉素的选择压力下筛选鉴定到连接正确的质粒，命名为pGSIAS。pGSIAS测序结果符合预期。在大观霉素的选择压力下，含有pGSIAS的胸膜肺炎放线杆菌血清1～10型菌株均生长良好；在氨苄青霉素的选择压力下，含有pGSIAS的大肠埃希氏菌生长良好。结果表明本研究构建的大肠埃希氏菌一胸膜肺炎放线杆菌穿梭载体pGSIAS序列正确，在胸膜肺炎放线杆菌及大肠埃希氏菌中均能复制并表达质粒上的相关基因。
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