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A型魏氏梭菌α毒素Asp-56基因定点突变与结构分析

作者:宫语晨; 许崇利; 钱爱东; 许崇波a型魏氏梭菌基因定点突变磷脂酶c活性圆二色光谱

摘要:为探索A型魏氏梭菌α毒素第56位天冬氨酸(Asp-56)对其生物学活性的影响,将仪毒素Asp-56密码子(GAT)定点突变成甘氨酸(Gly-56)密码子(GGT),构建了含α毒素D56G突变基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)(pM—D56G),该突变体蛋白表达量约为22.48%。仅毒素和仅毒素D56G突变体蛋白的二级结构主要由仅螺旋和无规则卷曲组成,两者的圆二色(CD)光谱检测有微小变化。生物学活性检测结果表明,仪毒素D56G突变体蛋白失去了α毒素的磷脂酶C活性,且仪毒素D56G突变体蛋白免疫的小鼠能够保护1MLD的A型魏氏梭菌标准株C57—1毒素攻击。此研究为进一步研究仅毒素分子结构与生物学功能的关系奠定了基础。

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