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含LacZ表达盒的鸭瘟病毒TK基因缺失转移载体的构建

作者:杨承槐; 李俊平; 李启红; 刘丹; 黄建华; ...鸭瘟病毒tk基因lacz转移载体

摘要:根据GenBank已发表的鸭瘟病毒活疫苗C—KCE株基因组序列设计一对引物,扩增出含TK基因完整ORF的2.7kb的片段,克隆至pMDl8Tsimple载体。利用该片段内的两个酶切位点劢oI和EcoRV,切除TK基因内的244bp,用T4DNA聚合酶补平末端;pVAX1-LacZ用NruI和NarI双酶切,回收含LacZ表达盒的4.1kb片段,通过平末端连接将LacZ表达盒插入到TK基因中,从而获得了转移载体pTK—LacZ,为构建重组鸭瘟病毒奠定了基础。

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