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吉林白鹅α干扰素基因的原核表达及抗血清的制备

作者:李公美; 胡静涛; 李玉梅; 李茂辉; 闫金明...吉林白鹅抗血清

摘要:采用PCR方法扩增了吉林白鹅α干扰素(JL-GolFN—α)成熟肽编码序列,将IFN—α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX—IFN—α,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)的感受态细胞里,在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST—IFN—α)。SDS—PAGE、Western—blot检测结果表明,重组吉林白鹅IFN—α融合蛋白(rJL—GoIFN-α)的分子量大小约为43ku,表达量占菌体总蛋白的25%。重组吉林自鹅仅干扰素,经谷胱甘肽Sepbarose-4B亲和柱层析纯化后,经过透析复性,得到纯化的目的蛋白,含量可达0.25mg/mL。将复性蛋白免疫新西兰白兔3次,制备高滴度的鹅IFN—α抗血清。本实验表达和纯化了鹅的IFN—α,并制备了兔抗鹅的IFN—α抗血清,为下一阶段鹅α干扰素重组蛋白的应用奠定了基础。

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