作者：刘百红; 熊宁; 王喜亮; 石德时; 李晓云; ...磺胺嘧啶单克隆抗体酶标抗原elisa
摘要：采用重氮化-偶联法将磺胺嘧啶（SD）与人血清白蛋白（HSA）相连制备了免疫抗原SD—HSA，与卵清白蛋白（OVA）相连制备了包被抗原SD—OVA，用过碘酸钠法将SD—OVA与辣根过氧化物酶（HRP）连接制备了酶标抗原（SD—OVA—HRP）。用SD—HSA免疫BALB／c小鼠，经融合、筛选和克隆化制备了单克隆抗体，利用单抗建立了直接竞争ELISA方法。该方法具有好的特异性，在1—729ng／mL浓度范围标准曲线方程Y=12．05x＋2．2538，R^2=0．995，IC50为41．7ng／mL，在猪肉、鸡肉、鸡肝、鸡蛋、牛奶中的检测限分别为20、20、20、5、5μg/kg。在20μg／kg和100μg／kg水平猪肉、鸡肉、鸡肝、牛奶、鸡蛋样品中添加，回收率为82．78％-104．6％。与高效液相色谱方法比较，二者的阳性符合率为81．3％，阴性符合率为83．3％，总符合率为88．9％；与同类英国RANDOX试剂盒比较，二者符合率为100％。
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