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半定量RT-PCR法分析猪肝脏中铜锌超氧化物歧化酶mRNA表达水平

作者:胡迎利; 徐春兰; 汪以真肝脏

摘要:细胞内铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)是动物体内一种重要的抗氧化酶。本实验室构建了优化的半定量RT-PCR法,以18S rRNA为内标,研究猪肝脏组织中CuZnSOD基因mRNA表达水平。提取猪肝脏组织总RNA,经反转录后进行扩增,先寻求PCR线性扩增范围,确定RT.PCR的最佳循环数和Mg^2+浓度。扩增后用VDS摄像系统扫描PCR扩增产物的电泳条带灰度。通过CuZnSOD PCR产物的灰度与18S rRNA PCR产物的灰度之比,即可计算出CuZnSOD mRNA的相对含量。

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