作者：司少艳; 宋淑军; 张建中; 刘俊丽; 张铭; ...重叠延伸pcr定点诱变技术金黄色葡萄球菌肠毒素a基因位点突变
摘要：目的纠正金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxixsA,SEA)基因中的点突变。方法以携带突变SEA基因的重组载体pLXSN-SEP为模板,采用重叠延伸PCR定点诱变技术,对SEA基因中第133位点碱基点突变(A→G)进行纠正,并构建真核表达载体pcDNA3.1-SEA及测序。结果突变的SEA基因第133位点碱基已由G纠正为A,SEA基因序列与Gene-Bank中公布的序列完全一致。结论重叠延伸PCR定点诱变技术高效、简便,可使SEA基因中突变位点得到纠正;载体pcDNA3.1-SEA的成功构建,为进一步应用SEA基因进行肿瘤基因治疗奠定了基础。
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