作者：杨琨; 李骏; 丰奇昊; 沈梦杰; 陈谦谦; 罗...黑色素瘤相关抗原d1外胚间充质干细胞增殖迁移wnt信号通路
摘要：目的 研究黑色素瘤相关抗原D1（Melanoma associated antigens,MAGE-D1）对大鼠牙胚来源的外胚间充质干细胞（Ectomensenchymal stem cells,EMSCs）增殖及迁移能力的影响。 方法 取SD大鼠孕19.5 d胎鼠牙胚组织，组织块法培养牙胚来源外胚间充质干细胞，流式细胞仪进行外胚间充质干细胞表面分子鉴定CD14、CD29、CD44、CD45、CD90、CD105、CD146、CD166和p75NTR，MAGE-D1 siRNA转染入外胚间充质干细胞，实验组分为：对照组（Control）和MAGE-D1 siRNA组（MAGEsiRNA-EMSCs），CCK8法和划痕法分别检测两组细胞增殖能力与迁移能力，Real Time-PCR及Western blot检测迁移及WNT通路相关基因MAGE-D1、β-catenin、E-cadherin的mRNA及蛋白表达量。 结果 组织块法成功培养出牙胚来源的外胚间充质干细胞，经流式细胞仪检测细胞阳性表达 CD14（92.16%）、CD29（94.53%）、CD44（99.51%）、CD90（95.18%）、CD105（34.22%）、CD146（92.39%）、CD166（98.15%）和p75NTR（88.56%），阴性表达CD45（0.5%）；CCK8法检测MAGE-D1 siRNA组EMSCs增殖能力受到抑制；划痕试验法检测MAGE-D1 siRNA组细胞48 h迁移量高于对照组细胞；Real Time-PCR检测Mage-D1、β-catenin和E-cadherin表达量，MAGE-D1 siRNA组EMSCs MAGE-D1和E-cadherin表达较对照组低，而β-catenin表达较高，Western blot检测MAGE-D1、β-catenin和E-cadherin表达水平趋势与Real Time-PCR结果相一致。 结论 抑制EMSCs中MAGE-D1的表达上调β-catenin，下调E-cadherin，能够提高细胞的迁移能力，但是其导致增殖能力降低，MAGE-D1可能作为EMSCs迁移增殖能力的关键因子。
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