作者：龚化; 周治军; 卢童; 徐康; 鲁文微小rna前列腺癌细胞增殖细胞迁移
摘要：目的探讨微小RNA（miRNA,miR）-148b-3p表达对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响机制。方法采用实时定量聚合酶链反应（qPCR）检测前列腺癌细胞株LNCap、22RV1、DU-145、PC-3和人正常前列腺上皮细胞RWPE-1中miR-148b-3p的表达。采用Lipofectamine 2000分别将miR-148b-3p inhibitor模拟物（实验组）和miR-NC（对照组）转染入PC-3细胞。qPCR检测PC-3细胞中miR-148b-3p的表达变化。CCK8法检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移能力。采用生物信息学技术和双荧光素酶报告基因检测实验分别预测和验证miR-148b-3p的潜在靶基因。qPCR和Western blot检测PTEN基因及CDK6、Cyclin D2、Claudin-1和Vimentin蛋白表达。结果前列腺癌细胞株LNCap、22RV1、DU-145、PC-3和人正常前列腺上皮细胞RWPE-1中miR-148b-3p的表达分别为0.18±0.08、0.60±0.10、0.44±0.07、0.55±0.13和1.02±0.24,前列腺癌细胞中miR-148b-3p表达明显降低（P〈0.01）。对照组和实验组PC-3细胞中miR-148b-3p的表达量分别为1.09±0.57和72.27±13.78（P〈0.001,t=10.320）。与对照组相比,细胞增殖能力和迁移能力均降低（P〈0.01）。通过生物信息学技术和双荧光素酶报告基因预测并验证了PTEN为miR-148b-3p的潜在靶基因。对照组和实验组PTEN mRNA的表达量分别为1.03±0.29和4.10±1.15（P=0.002,t=5.179）。与对照组相比,实验组中PTEN和Claudin-1蛋白表达升高,CDK6、Cyclin D2和Vimentin蛋白表达降低。结论 miR-148b-3p可通过上调PTEN基因的表达抑制PC-3细胞的增殖和迁移,延缓前列腺癌的进展。
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