作者：任艳青; 田宇柔; 李葆林; 高乐; 牛丽颖; ...黄连顺铂联用人肝癌hepg2细胞线粒体凋亡通路高内涵分析
摘要：目的:观察黄连配方颗粒含药血清单用及与顺铂联用对人肝癌Hep G2细胞增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:制备含药血清,MTT法筛选黄连血清抑制Hep G2细胞增殖的最佳作用浓度,最佳浓度血清与不同浓度的顺铂配伍,观察抑制增殖的协同作用;在此基础上,采用高内涵分析(high content screening assays,HCS)技术检测两药联合应用后线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential,MMP)、细胞膜通透性、细胞核的变化,反映细胞凋亡情况,Western blot法检测线粒体凋亡通路相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果:黄连血清可降低Hep G2细胞存活率,且呈现一定的浓度依赖性,20%血清为最佳浓度血清;配伍顺铂后,抑制增殖作用较单用黄连、顺铂显著增强。0. 6 g/kg 20%黄连血清、96μmol/L顺铂及两药合用均可显著降低MMP、提高细胞膜通透性、并可使核固缩及核荧光强度增强、细胞数量下降,并可显著下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax及Caspase-3蛋白表达;且配伍应用组上述各指标较黄连血清组单用组相比改变更显著,配伍应用组MMP、膜通透性、细胞数量、Bcl-2蛋白表达水平与顺铂组相比改变更显著。结论:黄连血清能抑制Hep G2细胞增殖并且诱导细胞凋亡,与顺铂联用具有协同作用,其机制可能与激活线粒体凋亡通路有关。
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