作者：李桂满; 王慧雯; 颜军; 张烜榕; 侯敏炭疽芽孢杆菌dna生物安全
摘要：目的 探讨炭疽芽孢杆菌DNA提取过程中的安全操作技术。方法 分别采用常规提取法-热裂解法、热裂解+0.45μm滤膜过滤法进行炭疽芽孢杆菌和蜡样菌群DNA提取,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法进行炭疽芽孢杆菌鉴定和毒力基因的检测。结果 常规提取法-热裂解法提取得到的炭疽芽孢杆菌DNA培养后出现了细菌菌落生长,生长比例占68.75%,热裂解+0.45μm滤膜过滤法提取得到的炭疽芽孢杆菌和蜡样菌群DNA培养后无细菌菌落生长。Real-time PCR检测中,炭疽芽孢杆菌疑似菌株均检出rpo B、pag A和cap基因。结论 以热裂解+0.45μm滤膜过滤法进行炭疽芽孢杆菌DNA提取,对提取的DNA进行培养验证无菌生长后再进行下一步试验,可以有效地降低炭疽芽孢杆菌DNA提取过程中的生物安全风险。
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