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大鼠H9c2心肌细胞有氧氧化及无氧酵解的影响因素探讨

作者:李彬; 崔琳; 王新陆; 王幼平; 谢世阳; 郝...参附益心颗粒心肌细胞能量代谢有氧氧化无氧酵解

摘要:目的利用细胞能量代谢检测系统(seahorse XF analyzer)探讨H9C2大鼠心肌细胞能量代谢的影响因素。方法 H9c2大鼠心肌细胞贴壁培养后以不同细胞密度接种于Seahorse XF24孔板,利用糖酵解压力试剂盒检测糖酵解压力曲线;以10^5/mL密度接种细胞,以不同浓度碳酰氰4三氟甲氧基苯胺(FCCP)刺激细胞,利用线粒体有氧氧化试剂盒检测线粒体功能。结果各密度下细胞反应良好,以2×10^4细胞数对寡霉素刺激后的速率数值较好,为50~400范围,是较合适的细胞密度;2μmol/LFCCP能刺激最大反应,为合适的FCCP浓度。结论细胞密度和FCCP浓度是影响心肌细胞有氧氧化及无氧酵解功能测定的主要因素,H9c2心肌细胞以2×10^4/孔细胞密度接种,FCCP浓度2μmol/L刺激细胞将适合细胞线粒体功能的检测。

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中西医结合心脑血管病

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