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橙皮素对大鼠肾动脉血管环的舒张作用机制探讨

作者:牛玉忠; 韩玲军肾动脉舒张血管橙皮素钙激活钾通道电压依赖性钾通道

摘要:目的研究橙皮素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞的舒张作用,并探讨其机制。方法大鼠处死后,在解剖显微镜下分离其肾动脉血管三级分支,剪成2mm长的血管环,通过微血管张力记录仪记录其张力,利用全细胞膜片钳技术记录其电压依赖性钾电流。首先观察橙皮素对静息状态下肾动脉张力的影响。然后将肾动脉血管环用60 mMKCl或10-5 mol/L PE预收缩达坪台,加入橙皮素(10-610-4 mol/L)对肾动脉进行浓度依赖性舒张,以预收缩的最大张力为100%,测定橙皮素对预收缩肾动脉血管环的舒张百分比。用60mMKCl或10-5 mol/L PE预收缩肾动脉达坪台后,预孵Kv通道抑制剂4-AP或KCa通道抑制剂TEA10min,然后加入不同浓度梯度的橙皮素(10-610-4 mol/L)舒张肾动脉,观察4-AP或TEA对橙皮素舒张肾动脉的影响。采用两步酶解法分离得到大鼠肾动脉血管平滑肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,观察并记录橙皮素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞电压依赖性钾电流的影响。结果橙皮素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞的静息张力没有产生显著影响。橙皮素(10-610-4 mol/L)可使预收缩的肾动脉血管环发生浓度依赖性的舒张,最大舒张幅度分别为(53.39±5.27)%(KCl预收缩)和(60.13±4.17)%(PE预收缩)。预孵TEA没有对橙皮素的舒张作用产生显著影响,预孵4-AP使橙皮素的舒张幅度减小了14.26%(KCl预收缩)和18.31%(PE预收缩)。橙皮素(浓度选用舒张实验计算所得RC50)可使大鼠肾动脉血管平滑肌细胞的电压依赖性钾电流I-V曲线发生非平行上移,最大电流密度增加了45.24%。结论橙皮素对KCl或10-5mol/L PE预收缩的大鼠肾动脉血管环有浓度依赖性的舒张作用;橙皮素对大鼠肾动脉的舒张作用与激活电压依赖性钾通道有关,与钙激活钾通道无关。

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