作者：高学松; 成军; 甄真; 杨艳杰; 黄燕萍; 刘...噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒核心启动子结合蛋白
摘要：目的:通过筛选乙型肝炎病毒(HBV)核心启动子(oore promoter,CP)结合蛋白,为HBV复制机制和调控机制的研究探索新的途径.方法:应用噬菌体展示技术,以HBV的核心启动子的聚合酶链反应(PCR)产物作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列分析和同源性搜索.结果:噬菌体经富集后,随机筛选得到7个阳性克隆,成功构建了克隆载体.序列测定后经过同源性搜索,确定了和HBV启动子结合的肝细胞蛋白基因序列,分别编码β2微球蛋白和3种未知功能蛋白.结论:用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到了与HBV核心启动子结合的蛋白,分析了该蛋白的编码基因,为进一步研究HBV与肝细胞相互作用的分子生物学机制开辟了新的途径.
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