作者:朱立; 陈盛; 李民消痹方骨髓间充质干细胞软骨细胞修复再生培养
摘要:目的:通过实验研究消痹方对促进BMSCs向软骨细胞方向分化的影响。方法:取SD大鼠后腿股骨,抽取骨髓后采用全骨髓法培养细胞,根据细胞数目分瓶传代。提取后的细胞按1∶3的比例进行传代接种培养,标记为F1;细胞传代培养融合后,标记为F2。调整细胞浓度为1×105/ml,保存备用。传代培养后的F2 BMSCs经处理后将其分为空白对照组、软骨诱导剂组及消痹方组,在诱导培养的第2天、6天、12天、14天分别进行观察。结果:培养第2天,3组的细胞均出现贴壁聚集。第6天,3组的细胞均成堆分布,聚集生长,消痹方组及软骨诱导剂组的细胞增殖速度高于空白组。第12天,消痹方组及软骨诱导剂组的细胞生长达到高峰期,其中消痹方组BMSCs呈多边形,软骨诱导剂组BMSCs呈圆形、椭圆形,空白组的细胞始终呈梭形。第14天,消痹方组及软骨诱导剂组的细胞的形态逐渐转成梭形,细胞活力降低,出现了去分化现象,空白组的细胞始终呈梭形,其形态保持单一生长,未出现细胞老化现象。消痹方组及软骨诱导剂组均呈现Ⅱ型胶原表达,且消痹方组的表达量比软骨诱导剂组高。结论:消痹方药液能促使BMSCs向软骨细胞分化,并可在一定程度上抑制BMSCs向肥大软骨细胞转化。
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