作者：唐海燕; 沈晓丽; 林立芳; 韩莉莉oct4sox2klf4慢病毒载体
摘要：目的构建Oct4，Sox2，c-Myc，K1f4基因慢病毒表达裁体，为诱导性多能干细胞研究奠定基础。方法将Oct4、Sox2、c-Myc、K1f4基因利用Infusion技术重组构建慢病毒裁体穿梭质柱pGC-FU-Oct4、pGc—Fu—sox2、pGc—Fu—c—Myc、pGC-FU-KIf4，经PCR和测序后与与结构质粒pHelperl．0和包膜质粒pHelper2．0在脂质体Lipofectamine2000介导下共转染293T细胞包装生产慢病毒，浓缩纯化后检测滴度。结果PCR扩增和测序结果证实成功构建Oct4，Sox2，c-Myc、K1f4的慢病毒载体并包装慢病毒，检测Oct4基因重组慢病毒．Sox2基因重组慢病毒，c-Myc基因重组慢病毒的滴度均为1×10^9Tu／mL，K1f4基因重组慢病毒的滴度为1．9×10^9TU／mL。结论成功建立重组慢病毒裁体的三质粒包装细胞系统。
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