作者：赵鹏 Keith E．Wosete 程飞 张硕新黑核桃微卫星反应体系群体遗传
摘要：优化SSR-PCR反应体系是黑核桃（JuglansnigraL．）SSR基因鉴定和群体遗传等研究的基础。本研究通过对PCR反应中Mg^2＋浓度、牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin，BSA）浓度、Taq聚合酶用量、dNTPs浓度、引物浓度和模板DNA量的组合以及PCR程序组合试验，确定了黑核桃SSR的最佳反应体系：，即在10止的PCR反应体系中，含10ng模板DNA，0．1mg·mL。牛血清蛋白（BSA），0．25mmol·L-dNTPs，1．5mmol·L。Mg^2＋1IxL10XTaqDNA聚合酶反应缓冲液，0．5Uraq聚合酶，1．0mmol·L“单对引物（0．5mmol·L“3对引物）。SSR．PcR反应扩增程序为：94℃变性3min；930C变性15s，500c或者53．5℃退火1rain，72℃延伸30s,32个循环；72℃后延伸10rain，置4℃保存。利用此反应体系对黑核桃进行PCR扩增并电泳检测，其结果清晰、稳定、可靠，适合进一步对黑核桃群体遗传、基因型鉴定和分子生态研究。
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