作者：王宝霞; 齐永红; 肖雅尹; 崔丽艳; 王德富...半夏茎尖培养脱毒苗病毒检测
摘要：以半夏(Pinellia ternata)茎尖为外植体,研究不同生长调节物质浓度配比对半夏茎尖脱毒苗诱导效果的影响。在单因素试验基础上,分别选取6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三个最优诱导浓度设计L29(3)正交试验,以确定茎尖愈伤组织诱导的最适培养基,并利用分子生物学方法对脱毒苗进行病毒检测,结果表明:当6-BA浓度为1.5 mg·L^-1, 2,4-D浓度为2.0 mg·L^-1时,愈伤组织诱导率最高。正交试验得出诱导愈伤的最佳培养基配方为MS+1.5 mg·L^-1 6-BA+2.0 mg·L^-1 2,4-D+7 g·L^-1琼脂+30 g·L^-1蔗糖,并可一次性成苗。该培养基所诱导的脱毒苗经斑点酶联免疫吸附法(DOT-ELISA)和反转录PCR检测后,烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)和大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus, SMV)脱毒率均达到100%。
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