作者:李绍军; 龚月桦; 王俊儒; 梁宗锁脯氨酸含量茚三酮反应生成磺基水杨酸植物生理学回归方程标准曲线测定原理酸性条件实验指导比色法产物红色波长
摘要:测定脯氨酸含量的方法通常用磺基水杨酸或酒精提取再与酸性茚三酮反应生成稳定的红色产物,然后于波长520 nm处比色,通过标准曲线或回归方程计算脯氨酸的含量.关于其测定原理,一些植物生理学实验指导明确指出:"在酸性条件下,脯氨酸和茚三酮反应生成稳定的红色产物,用比色法于520 nm波长下测定脯氨酸的含量."[1,2]然而,在各种生物化学教科书[3~6]中描述氨基酸茚三酮反应时,则为:"在弱酸性条件下,2个亚氨基酸--脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应并不释放NH3,而直接生成黄色化合物,其结构式如图1,最大光吸收在440 nm."为了对两种教材中不同的说法进行比较,我们查阅了各种文献,设计一些试验并进行了验证.
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