作者:陈芳; 周明; 赵岩; 滕吟; 朱菁萍; 赵开弘藻蓝蛋白cpcacpcecpcf体内重组
摘要:为了研究藻蓝蛋白α亚基的生物合成途径,通过构建相容的3种重组质粒pETDuet—cpcA、pCOLADuet-cpcE—cpcF和pACYCDuet-hol-pcyA,将裂合酶基因cpcE和cpcF、血红素氧化酶基因hol、藻蓝胆素合成酶基因pcyA和脱辅基藻蓝蛋白仅亚基基因cpcA共同转入大肠杆菌BL21(DE3)。通过色素蛋白锌电泳和光谱检测表明产生了生物活性的CpcA—PCB。成功实现了大肠杆菌内藻蓝蛋白α亚基84位半胱氨酸残基与PCB的连接。而在裂合酶基因cpcE和cpcF不转入大肠杆菌的情况下,大肠杆菌内只有0.2%的CpcA—PCB产生。以上研究为进一步在大肠杆菌内合成天然的藻蓝蛋白奠定了基础。
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