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菜豆荚斑驳病毒外壳蛋白大小亚基的原核表达及其抗血清制备

作者:陈定虎; 刘恭源; 郑传发; 管维; 熊仁广; ...菜豆荚斑驳病毒外壳蛋白大亚基小亚基原核表达抗血清

摘要:本研究对菜豆荚斑驳病毒大、小亚基编码的基因密码子进行了优化并人工合成了这两个基因,然后克隆到原核表达载体p ET-22b(+)中,通过转化大肠杆菌BL21(DE3)菌种并在IPTG的诱导下进行了成功表达,大亚基表达产物分子量为41 k D、小亚基表达产物分子量为22 k D,并制备出了大小亚基基因表达产物的抗血清。测试结果表明,优化后的CP的大、小亚基基因在37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导下,3 h后得到了成功的表达,制备的两种抗血清特异性强、效价都达到1∶3.2×10~4,可以对BPMV CP 3个不同的区域同时进行检测,提高了检测的准确度。

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植物检疫

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