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柑橘溃疡病菌免疫荧光和生物学检测技术研究

作者:罗志萍; 洪霓柑橘溃疡病菌致病性试验免疫荧光柑橘

摘要:本研究通过对7个不同柑橘品种的离体叶片接种及致病性观察筛选出了柑橘溃疡病菌敏感寄主材料,并建立了柑橘溃疡病菌的生物学检测方法;还初次尝试建立了一种简便易行的柑橘溃疡病菌免疫荧光快速鉴定方法。柑橘离体叶片接种实验结果表明:福本、红肉脐橙、纽荷尔和枳壳对柑橘溃疡病菌表现出一定的感病性,而粗柠檬和邓肯葡萄柚未表现出明显感病迹象,反而出现了坏死性应激反应。免疫荧光试验结果显示:浓度为10^3cfu/mL的菌液在30℃下用BSA封闭2h,30℃下抗体结合1h,荧光抗体浓度为4μg,/mL,室温放置40min后镜检,就可以在荧光显微镜下清晰地看到绿色的柑橘溃疡病菌体,而用该方法检测不到水稻白叶枯病菌。用免疫荧光抗体检测柑橘溃疡病菌操作简便,仅需一台荧光显微镜,整个检测过程仅需要4h。

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植物检疫

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