作者：史亚娟; 孙新艳; 袁虹霞; 邢小萍; 王振跃...玉米穗腐病双重pcr禾谷镰孢拟轮枝镰孢
摘要：禾谷镰孢(Fusarium graminearum)和拟轮枝镰孢(Fusarium verticillioides)是引起玉米穗腐病的两种主要病原菌。为了建立这两种病原菌的快速和定量检测体系,本研究分别设计了针对F.graminearum和F.verticillioides的基因特异性引物,建立了双重PCR反应体系,并从DNA浓度、引物浓度和退火温度3个方面对反应体系进行了优化。结果表明,退火温度为54℃和58℃时扩增效果较好,DNA模版的检测灵敏度可以达到6.25 ng·μL-1;F.graminearum和F.verticillioides引物最佳终浓度配比为0.2μmol·L-1/0.4μmol·L-1。本研究建立的双重PCR对同时鉴别引起玉米穗腐病的两种主要镰孢菌提供了准确、快速、灵敏的检验检疫技术。
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