作者：任芳; 张尊平; 范旭东; 胡国君; 李正男; ...葡萄病毒b外壳蛋白基因植物表达载体烟草遗传转化
摘要：葡萄病毒B Grapevine virus B（GVB）是葡萄皱木复合病中栓皮病的病原,为开展抗GVB转基因研究,本研究利用RT-PCR技术克隆GVB外壳蛋白（coat protein,CP）基因,与植物表达载体pRI 101-AN连接构建植物表达载体pRI-GVB CP。采用电击转化法将植物表达载体pRI-GVB CP导入农杆菌LBA4404,并利用农杆菌介导的叶盘转化法将外源基因导入西方烟‘37B’。共获得16个烟草再生株系,PCR检测其中3个株系为阳性,阳性株系播种获得的64株T1代植株中有30株扩增到目的条带,阳性率为46.9%,表明目的基因GVB cp成功导入烟草并可成功遗传到子代。28株T1代转基因植株接种病毒进行抗病性鉴定,其中有6株对接种病毒GVB具有抗性。
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