作者：黄永红 徐方云 吕农华胃肿瘤水通道蛋白质5转染
摘要：目的构建人pcDNA3．1-AQP5／myc—His真核表达质粒，观察水通道蛋白5（AQP5）基因在胃癌AGS细胞中的稳定表达。方法采用基因重组技术将人AQP5cDNA插入真核表达载体pcDNA3．1／myc—His，构建人pcDNA3．1-AQP5／myc—His真核表达质粒。脂质体介导空载体pcDNA3．1／myc—His和表达质粒pcDNA3．1-AQP5／myc—His分别转染人胃癌AGS细胞株，G418筛选，挑取阳性克隆，扩大培养，逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法（WesternBlot）分别检测AQP5mRNA和蛋白表达。结果双酶切和基因测序结果均证实人pcDNA3．1-AQP5／myc—His真核表达质粒构建成功。AQP5转染组与空白对照组、空载体组比较，AQP5mRNA表达显著增加（P〈0．05），AQP5蛋白表达显著上调（P〈0．05）。结论成功构建人AQP5真核表达质粒并获得稳定表达AQP5基因的胃癌AGS细胞系，为进一步研究AQP5蛋白对胃癌恶性表型的影响奠定实验基础。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
