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γ-氨基丁酸通过其B受体影响小鼠植入前胚胎的发育

作者:田娜; 曹科; 杨根岭; 陈文豪; 王晓杰; 张...植入前胚胎囊胚形成

摘要:目的:探讨γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)对小鼠植入前胚胎发育的影响及其机制。方法:(1)收集不同发育阶段的小鼠植入前胚胎,通过激光共聚焦检测GABA及其B受体B1亚基(B receptor B1 subunit,GB1)、A受体pi亚基(A receptor pi subunit,GABRP)以及GABA合成酶(L-glutamate decarboxylase,GAD67)的表达。(2)不同发育阶段的胚胎分别培养在含10,20,30,40,50μg/μL GABA和40μmol/L B型受体抑制剂(3-Amino-2-(4-chlorophenyl)-2-hydroxypropanesulfonic acid,2-hydroxysaclofen)的培养液中,48-72 h时观察囊胚的形成并计算囊胚形成率。结果:(1)GABA与其受体GB1蛋白在小鼠胚胎中的表达模式一致,在2-细胞和4-细胞阶段,主要表达在细胞膜上,而在8-细胞至囊胚阶段,则转移到细胞核中表达;而另一受体GABRP在植入前胚胎的各个阶段均不表达。GAD67在胚胎发育的各个阶段均有表达。(2)各发育阶段胚胎的囊胚形成率均随着GABA浓度的增加而下降,且呈剂量依赖性;10μg/μL GABA可显著降低2-细胞胚胎的囊胚形成率(92%vs.99%,χ^25.70,P=0.035)。(3)40μmol/L 2-hydroxysaclofen能够有效逆转30μg/μL和40μg/μL GABA对囊胚形成的抑制作用(99%vs.45%,χ^272.32,P=0.000;99%vs.4%,χ^2180.66,P=0.000)。结论:GABA通过其B受体抑制小鼠植入前胚胎的发育。

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