作者:何犇 唐伟 罗华铭 郭毅 李跃华精子蛋白质精索静脉曲张双向电泳蛋白质组学
摘要:目的:建立与优化精索静脉曲张不育患者精子蛋白质组双向凝胶电泳技术。方法:采取Percoll密度梯度离心法提取精索静脉曲张不育患者精子,比较不同精子蛋白样品制备方法、不同胶条、不同上样量和不同水化方式对双向凝胶电泳结果的影响。结果:使用clean-up kit法对样品进行预处理,选取pH 5~8的固相化pH梯度胶条,采用250μg的上样量和主动水化方式能获得背景干净、分辨率高的双向电泳(Two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱。结论:成功建立了精索静脉曲张不育患者精子蛋白双向凝胶电泳平台,所获2-DE图谱的分辨率高、重复性好,为进一步探讨精索静脉曲张导致不育的分子机制奠定了技术基础。
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