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Oct-4表达下调促大鼠骨髓多能成体祖细胞向心肌分化

作者:谢靖芸 吕铁伟 朱静 陈国珍 孙慧超 刘振...mapcs大鼠心肌细胞细胞分化

摘要:目的:明确骨髓多能成体祖细胞(Bonemarrowmultipotentadultprogenitorcells,MAPCs)体外向心肌特异性分化及其与八聚体结合转录因子4(Octamer-bindingtranscription factor-4,Oct-4)表达的相关性。方法:将大鼠骨髓中分离出的MAPCs,在无血清培养基中连续培养35 d,采用5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza,1μmol/L)诱导24 h促使其向心肌细胞分化。结果:MAPCs在5-aza诱导的24 h后早期心脏特异性基因NKx2.5与GATA-4的mRNA水平显著增加,Western blot和免疫荧光染色显示心肌特异性蛋白Connexin-43与肌钙蛋白Ⅰ在5-aza诱导后的7 d开始表达,流式细胞分析表明在35 d后超过37%的细胞为肌钙蛋白Ⅰ阳性;同时实时定量聚合酶链反应、Western blot、免疫荧光染色和流式细胞技术检测到未分化的MAPCs高表达特异性干细胞标志物Oct-4,但在心肌分化过程中其表达明显下降。结论:MAPCs在5-aza诱导后能够有效地分化为心肌样细胞,并与Oct-4的表达下调相关。

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