作者:胡仁建 蔡家利 范开 谢敏 吴鹏 刘卫超 吴...hpv16e6caskipcr
摘要:对构建HPV16 E6基因的原核表达质粒pET28a(+)-HPV16 E6进行研究。从宫颈癌细胞株CaSki细胞中提取的的DNA基因组为模板,设计一对特异性引物,用PCR法扩增出HPV16 E6基因片段。HPV16 E6基因片段和质粒pET28a(+)经NcoI和HindⅢ双酶切后用T4 DNA连接酶连接。构建的重组质粒pET28a(+)-HPV16 E6转化大肠杆菌DH5a,经PCR鉴定和酶切鉴定筛选出阳性克隆,将阳性克隆的质粒转化到大肠杆菌BL21 Star-DE3 Plyss中,构建了HPV16 E6基因原核表达质粒pET28a(+)-HPV16 E6。HPV16 E6基因原核表达质粒pET28a(+)-HPV16 E6的构建为HPV16 E6重组蛋白的制备和为宫颈组织HPV16型感染的早期诊断和相关治疗性疫苗的研制奠定了物质基础。
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