作者：徐嘉惠; 周艺; 王雯同型半胱氨酸乳鼠心肌细胞自噬哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
摘要：高同型半胱氨酸血症（HHcy）是心血管疾病的一个独立的危险因素，但其对心肌的损伤机制尚不清楚。细胞自噬是近几年研究比较热门的细胞自身保护机制，有研究发现同型半胱氨酸（Hcy）可抑制神经细胞的自噬水平，但其对心肌细胞自噬水平的作用尚不清楚。本研究利用体外细胞实验初步探讨Hcy对心肌细胞自噬水平及自噬调节信号通路mTOR通路的影响。通过原代乳鼠心肌细胞体外培养，给予Hcy共孵育刺激，利用western blot检测心肌细胞自噬相关蛋白LC3表达水平的改变以及mTOR信号通路蛋白磷酸化水平的改变；给予LC3双标签腺病毒Ad-GFP-RFP-LC3感染细胞24 h后，进行Hcy刺激，利用激光共聚焦显微镜观察自噬流的改变；对心肌细胞进行AnnexinV/PI双标记染色，利用流式细胞仪计数检测细胞凋亡情况。结果发现，给予Hcy刺激后，乳鼠心肌细胞凋亡率升高，自噬水平降低，自噬调节信号通路mTOR及其下游p70 S6K磷酸化水平升高。这些结果提示Hcy可降低心肌细胞自噬水平，mTOR信号通路可能参与其中。
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