作者：周艺; 王鑫; 朱翠明; 蒋永林; 粟盛梅; 尹...人乳头瘤病毒e6基因e6蛋白
摘要：目的 构建HPV16E6基因的真核表达载体，为在酵母菌中表达以及进一步探讨HPV16E6基因与宫颈癌发生的关系奠定前期实验基础。方法用PCR扩增含EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的E6基因序列，双酶切pGADT7载体与E6基因PCR产物，纯化回收后，用连接酶将二者连接并转化大肠杆菌JM109，筛选阳性克隆，并对其进行双酶切和测序鉴定，构建HPV16E6基因的真核表达载体pGADT7-E6。结果双酶切pGADT7-E6后，琼脂糖凝胶电泳显示2个片段，分别在约500bp与8．0kb处。DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析，显示重组质粒含有477bp的目的基因片段，读码框正确，无碱基错配和移码突变。结论 成功构建了HPv16E6基因真核表达载体pGADT7-E6。
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