作者:安娟; 潘元明; 康倩; 王昕; 孙伟; 晏宇鹏...pdcd4胃癌高原地区血清标志物
摘要:目的分析胃癌患者血清miR-181d和PDCD4的表达及调控机制。方法利用Real-time PCR检测6株胃黏膜细胞系中miR-181d和PDCD4的表达,并通过Western blot检测PDCD4的表达;采用Real-time PCR检测58例胃癌患者和50例健康体检者血清miR-181d的表达,并通过ELISA方法检测PDCD4的表达;采用化学法合成干扰/过表达miR-181d及构建PDCD4 3'-UTR荧光报告素载体检测miR-181d对PDCD4的调控。结果Realtime PCR结果显示miR-181d和PDCD4在胃癌细胞系中存在差异表达;miR-181d在胃癌患者血清中的表达高于健康体检者(P﹤0.001),PDCD4表达则降低(P﹤0.05),通过临床相关性分析表明,胃癌血清miR-181d与PDCD4呈显著负相关(R2=-0.44),并在健康体检者中miR-181d与PDCD4蛋白呈负相关(R^2=-0.426);结合临床资料分析,血清miR-181d的表达与吸烟喝酒史呈正相关(P=0.015,P=0.034),而靶基因PDCD4仅与饮酒史相关(P﹤0.001);ROC分析显示血清miR-181d与PDCD4用于体外诊断区分肿瘤和健康体检者具有良好的特异性与敏感度。过表达miR-181d于AGS细胞后PDCD4表达下降;反义miR-181d转染BGC823细胞后PDCD4表达增加。双荧光报告系统发现miR-181d可作用于PDCD4 3'-UTR区。结论在胃癌患者血清中miR-181d的表达较高,而PDCD4的表达较低,并且miR-181d可能是通过作用于PDCD4 3'-UTR区发挥作用。
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