作者：邹冬玲 王冬 周琦宫颈肿瘤微rnas细胞周期蛋白d2mi
摘要：目的:分析微RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)在宫颈癌组织中的表达情况,并探讨miR-29b在宫颈癌发生过程中的作用及其可能的机制。方法:利用实时荧光定量PCR法检测miR-29b在50例宫颈癌组织标本中的表达情况,分析miR-29b表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系。在宫颈癌SiHa细胞中转染miR-29b模拟物,然后采用CCK-8法、FCM法、细胞划痕实验及Transwell法检测miR-29b过表达对宫颈癌细胞增殖、周期分布和迁移的影响。通过Targetscan软件预测miR-29b的靶基因,然后采用双荧光素酶报告基因实验和蛋白质印迹法明确miR-29b在SiHa细胞中与该靶基因的相互作用。实时荧光定量PCR法检测miR-29b的靶基因在宫颈癌组织中的表达情况。结果:miR-29b在宫颈癌组织中的表达水平与相应癌旁正常组织相比明显下降(P<0.05)。模拟物转染后miR-29b过表达,能明显抑制宫颈癌细胞的增殖和迁移,且提高G1期细胞所占百分率(均P<0.05)。miR-29b与其靶基因细胞周期蛋白D2(cyclin D2,CCN D2)相互作用,在宫颈癌细胞中二者表达呈负相关性(r2=0.225,P<0.05)。宫颈癌组织中CCN D2表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。结论:miR-29b水平在宫颈癌组织中显著下调。初步的体外实验结果提示,它可能作为一种抑癌基因,通过下调CCND2表达,参与宫颈癌的发生与发展。因此,预测miR-29b可能将作为宫颈癌诊断和治疗的新的作用靶点。
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