作者：董嵩; 吴一龙; 郭爱林; 陈志红; 谢至; 林...癌非小细胞肺核苷酸还原酶类基因表达实时定量荧光pcr
摘要：目的：建立检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织及外周血RRM1 mRNA表达水平的实时定量荧光PCR方法，比较不同标本的检测方法及效果，为临床应用该基因表达水平预测药物疗效提供方法基础。方法：构建RRM1基因的质粒标准品，运用AB17000 PCR仪进行实时定量分析，探索最佳反应条件并建立标准曲线用以检测临床标本。结果：检测了18例患者的肺癌及正常肺组织标本，同时检测了17例患者的外周血标本，以β-actin为管家基因计算得肺癌组织相对表达量平均为4．46×10^-3，正常肺组织为3．43×10^-3，外周血为2．54×10^-3。Ct值与模板起始浓度对数值之间有良好的线性相关。结论：所建SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法能成功检测肺癌组织及外周血单个核细胞RRM1 mRNA表达水平，检测方法基本相同，有较高的敏感性与特异性，可应用于临床检验工作。
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