作者:李燕; 杨文育; 高诗雨; 林坚炜; 王天琪; ...清心开窍方原代海马神经元细胞胰岛素样生长因子1受体胰岛素受体底物蛋白1
摘要:目的:研究清心开窍方对Aβ25-35诱导原代海马神经元细胞损伤胰岛素样生长因子1受体(insulin—like growth factor 1 receptor,IGF-1R)、胰岛素受体底物蛋白1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)及β-淀粉样蛋白(β—amyloid,Aβ)基因表达的影响,探讨清心开窍方对神经元细胞的保护作用及其机制。方法:制备sD乳鼠原代海马神经元细胞,分为6组:正常对照组、模型组、尼莫地平组(1×107mol.L-1)、清心开窍方低、中、高剂量组(6.25、12.5、25mg/mL)。支持培养至第7天,各治疗组分别给予相应药物预处理24h后,模型组及各治疗组加入老化处理的Aβ25-35。(终浓度为10 μmol.L-1)共同作用24h,建立AD细胞模型。正常对照组给予相等体积的培养液继续孵育24h。采用CCK一8法检测各组的细胞活力,RT—PCR法检测各组IGF-1R、IRS-1和Aβ mRNA的表达水平。结果:模型组与正常对照组比较细胞活性明显降低(P〈0.01),而清心开窍方能有效改善细胞活性;RT—PCR法结果显示模型组IGF-1R mRNA明显降低(P〈0.01),IRS-1和Aβ mRNA表达均明显增加(P〈0.01),而不同浓度的清心开窍方处理后均能提高IGF-1R mRNA的表达(P〈0.01或P〈0.05),减少IRS-1和Aβ mRNA表达(P〈0.01或P〈0.05)。结论:清心开窍方能减轻β一淀粉样蛋白对神经元细胞的毒性作用,提高细胞存活率,保护海马神经元细胞。
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