作者：成晓青; 蒋秀琴sirna干扰血管内皮细胞细胞增殖细胞迁移
摘要：目的半乳糖凝集素-3（Galeetin-3）在肿瘤血管形成中起重要作用，关于其在血管内皮细胞生物学行为中的研究较少。本研究探讨siRNA转染下调Galectiw3表达对血管内皮EA．hy926细胞增殖和迁移能力的影响。方法将EA．hy926细胞分为干扰组、阴性对照组和空白对照组，干扰组转染Galectiw3特异性小干扰RNA（small interference RNA，siRNA），阴性对照组转染阴性对照siRNA，空白对照组只加转染空白试剂。蛋白质印迹法检测转染前后EA．hy926细胞内Galectin3蛋白表达的变化，MTT比色法检测转染前后EA．hy926细胞增殖变化，Transwell小室法检测转染前后EA．hy926细胞迁移变化。结果干扰组EA．hy926细胞转染3条靶向siRNA后，Galectin3蛋白表达量分别为0．07±0．02、0．25±0．01和0．26±0．04，其中序列1的干扰效果最佳。转染序列1的EA．hy926细胞中Galectin-3蛋白表达低于阴性对照组的0．77±0．05（t=9．52，P=0．011），也低于空白对照组的0．87±0．11（t=11．23，P=0．003），故选择转染序列1的细胞作为干扰组进行后续实验。干扰组EA．hy926细胞增殖能力在72h为0．38±0．02，低于阴性对照组的0．52±o．01（t=11．32，P=0．001）和空白对照组的0．54±0．01（t=11．73，P=0．001）。干扰组EA．hy926细胞迁移的细胞数目为32．67±9．02，低于阴性对照组的84．00±2．65（t=12．54，P=0．001）和空白对照组的85．33±4．73，t=12．66，P=0．001。结论靶向Galectin-3的特异siRNA能够下调Galectin3在EA．hy926细胞中的蛋白表达水平，有效抑制EA．hy926细胞的增殖和迁移能力。
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