作者:竺炎 吴传高 刘少平 邱惠 谢丛华 周福祥wrap53rnaiwtp53放射敏感性细胞周期
摘要:目的:探讨干扰Wrap53基因表达对肿瘤细胞放射敏感性的作用及其分子机制。方法:构建针对Wrap53的干扰质粒;脂质体转染法转染至p53野生型(wtp53)的人骨肉瘤U20S细胞;RT-PCR和蛋白质印迹法检测Wrap53和wtp53基因的mRNA和蛋白表达;克隆形成实验测定放射敏感性参数;流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞周期变化。结果:Wrap53的特异性shRNA质粒转染U20S细胞后,细胞内Wrap53和wtp53的mRNA和蛋白表达水平均受到明显抑制;Wrap53基因干扰组U20S细胞的D0值为0.44±0.01,明显高于阴性对照组0.37±0.01,P=0.001,Wrap53基因干扰组SF2值为0.72士0.10,高于阴性对照组0.44±0.02,P=0.047;Wrap53干扰细胞在放射后16h(P=0.014)和24h(P=0.011)的Gz/M期阻滞更加明显,显著高于对照组;但Wrap53干扰细胞在放射后出现G,期阻滞减少,以放射后24h最为显著,P=0.001。结论:干扰Wrap53基因表达降低了U20S细胞的放射线敏感性,该作用可能与下调wtp53表达和诱导细胞放射后G2/M期阻滞有关。
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