作者:汤宇; 崔雪梅; 袁玫; 卢世璧; 朱克顺肉瘤180热休克蛋白质类70分离和提纯动物实验
摘要:目的:建立热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)/肽复合物分离、纯化和鉴定的技术平台.方法:NH小鼠接种S180肉瘤细胞,将肉瘤组织热休克处理后经Sephacryl S-200HR分子筛、ConA和ADP柱序列层析进行分离,所得蛋白经电泳及Western blot进行相对分子质量及性质鉴定,用Lowry标准曲线法对各阶段洗脱液进行蛋白定量分析,并计算蛋白得率.结果:纯化蛋白经鉴定确系相对分子质量为70×103的HSP70蛋白;每克湿重瘤组织可纯化约50 mg HSP70.结论:用上述蛋白层析法可分离获得较纯的HSP70蛋白,为临床实际应用提供基础.
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