作者：石园 陈颖 侯英勇 季春华 胡沁 周杨 宿杰...癌非小细胞肺dna修复酶
摘要：目的观察核不均一核糖核蛋白A2／B1（hnRNPA2／B1）住非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与DNA修复酶O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）、8-羟基吗嘌呤DNA糖甘酶（OGGI）、氧化还原因子1（Ref-1）、DNA依赖性蛋白激酶复合物DNA—PKcs和Ku mRNA之间的相互作用，并进一步探讨其在NSCLC发病机制中的作用。方法采刚免疫绀化、Western blot及荧光实时定量PCR方法，检测NSCLC患者癌组织及正常肺组织hnRNPA2／B1的表达。采用免疫共沉淀结合逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法，研究人肺鳞癌细胞株中hnRNPA2／B1蛋向是否与上述5种DNA修复酶的mRNA直接结合，然后采用免疫组化及荧光实时定量PCR方法，榆测NSCLC患者痛绀织及正常肺组织MGMT的表达情况。结果免疫组化染色显示，hnRNPA2／B1定位于细胞核，hnRNPA2／B1在NSCLC癌组织中的表达阳性率（100％）和蛋白表达评分[（5．3±0．9）分]均显著高于正常肺组织[32％和（2．2±0．7）分，P〈0．01]，在Ⅲ～Ⅳ期NSCLC组织中的表达略高于J～Ⅱ期（P〈0．05），而与年龄、性别、组织学类型及吸烟状况无关（均P〉0．05）。通过tiT—PCR方法可以从人肺鳞癌细胞株免疫共沉淀产物中扩增出MGMT mRNA，提示hnRNP A2／B1与MGMT mRNA相结合。进一步的免疫组化染色结果显示，在NSCLC组织中，MGMT的表达阳性率为32．0％，明娃低于止常肺组织（78．0％），蛋白表达评分[（2．2±0．8）分]也显著低于正常肺组织[（4．1±1．2）分，P〈0．01]。荧光实时定量PCR结果显示，NSCLC组织中MGMTmRNA的表达量为1．8（0．6～3．1），明显低于正常肺组织[9．8（6．8～18．3），P〈0．01]。结论HnRNPA2／BI蛋白及mRNA在NSCI．C组织中的表达均升高，hnRNPA2／B1与MGMTmRNA相结合，可能通过对MGMTmRNA的转录后调控参与NSCLC的发牛。
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