作者：万小云; 毛愉燕; 横山康宏pten基因子宫内膜肿瘤阿霉素凋亡pten基因转染化学敏感性癌细胞系诱导凋亡子宫内膜hoechst33258
摘要：目的探讨PTEN基因是否增强子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞对阿霉素的敏感性.方法将PTEN基因转染前、后的Ishikawa细胞分别暴露于系列浓度的阿霉素,以MTT法测定这些细胞对阿霉素的敏感性,并通过Hoechst 33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡情况.同时,以免疫沉淀Western blot法观察阿霉素对Bad 和 Akt/PKB蛋白磷酸化的影响.结果阿霉素以剂量依赖方式诱导全部细胞系的细胞凋亡,但对表达PTEN的克隆细胞所诱导的凋亡比对亲本株Ishikawa细胞更明显.低浓度阿霉素(0.1 μmol/L)不引起PTEN蛋白缺失的Ishikawa细胞凋亡,但却能诱导表达PTEN蛋白克隆细胞凋亡;高浓度阿霉素(1 μmol/L)诱导全部细胞系的细胞凋亡,但凋亡的发生率在表达PTEN的克隆细胞中明显高于亲本株Ishikawa细胞.在表达PTEN的克隆细胞中,磷酸化Akt/PKB 和磷酸化Bad (Ser-136)的水平均下降.阿霉素降低了全部细胞系的磷酸化Akt/PKB 和磷酸化Bad (Ser-136)水平,但在表达PTEN的克隆细胞中降低最明显.结论 PTEN基因转染明显地增强了Ishikawa细胞对阿霉素的化学敏感性,阿霉素可能是通过下调PI3k/Akt/PKB信号途径而与PTEN蛋白共同发挥凋亡诱导作用.
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