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温湿度对高通量酶联免疫吸附实验测定丙型肝炎病毒抗体结果的影响

作者:董海新; 金呈强; 赵元明; 张健; 孙晶; 余...温度湿度酶联免疫吸附测定肝炎抗体丙型

摘要:目的探讨实验室温湿度对高通量酶联免疫吸附实验(ELISA)测定丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)标准品结果的影响。方法利用艾德康全自动酶免仪(ELISA 1100型),恒温24℃、不同相对湿度(%RH)(30%RH、40%RH,50%RH、60%RH、70%RH、80%RH、90%RH)条件下及湿度50%RH、不同温度(16℃、18℃、20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃、32℃、34℃、36℃、38℃、40℃)条件下,分别对HCV-Ab标准品进行测定。结果在排除湿度影响的情况,在温度16℃~36℃条件下进行实验显示,HCV-Ab的S/CO值(分别为3.93±0.09,4.43±0.15,5.16±0.11,6.00±0.17,6.43±0.12,7.43±0.10,7.84±0.15,7.97±0.47,8.24±0.29,8.64±0.61,9.24±0.43)之间差异有统计学意义(F=620.08,P=0.000),且标准品S/CO值均随着温度升高而逐渐升高,HCV-Ab标准品的ELISA结果与温度呈正相关(r=0.97)。36℃和38℃之间S/CO值(9.24±0.43,9.29±0.30)差异无统计学意义(t=0.52,P〉0.05),而38℃和40℃之间的S/CO值(9.29±0.30,8.65±0.77)差异有统计学意义(t=8.17,P〈0.05)。而在排除温度影响的情况,不同湿度(30%RH、40%RH,50%RH、60%RH、70%RH、80%RH、90%RH)间S/CO值结果(分别为7.20±0.18,7.09±0.32,5.83±0.27,5.38±0.24,3.91±0.28,3.27±0.49,3.04±0.85)差异有统计学意义(F=985.64,P=0.000),且标准品S/CO值随着湿度升高而逐渐降低,HCV-Ab标准品ELISA结果与湿度呈负相关(r=-0.98)。结论不同的温湿度对高通量ELISA检测结果有着重要影响,尽量选择温度不超过36℃和湿度较低的环境进行高通量的ELISA测定,综合考虑推荐全自动酶免仪工作温度范围控制在18℃~25℃之间,湿度控制在35%RH~50%RH之间。

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