作者：朱明利; 王晶晶; 潘万能; 刘寿荣; 朱元东胆囊结石胆汁纳米细菌透射电镜负染法间接免疫荧光法
摘要：目的研究胆结石患者胆汁及结石中纳米细菌(NB)的感染情况,分析纳米细菌与胆结石形成的关系,探讨纳米细菌在胆结石形成中的可能机制。方法选择2013年10月-2014年12月杭州市西溪医院外科手术患者,术中无菌收集胆汁43例(胆囊结石患者36例,非胆囊结石患者7例),结石30例。采用细胞培养的方法,对胆汁及结石中的纳米细菌进行分离培养。采用间接免疫荧光法、透射电镜负染法、茜素红钙染色法、PCR法等对纳米细菌进行鉴定。结果以间接免疫荧光法为金标准,胆汁中纳米细菌阳性率为44.18%(19/43),其中胆结石患者胆汁纳米细菌阳性率为50.00%(18/36),非胆囊结石患者胆汁中纳米细菌阳性率为14.29%(1/7);结石中纳米细菌阳性率为60.00%。胆囊结石患者胆汁与结石中NB的阳性率无统计学差异。钙染色法与间接免疫荧光法、PCR法与间接免疫荧光法检测纳米细菌无统计学差异。结论纳米细菌与胆结石密切相关。胆结石患者纳米细菌的感染率较高,可能会促进胆结石的形成。采用细胞培养、稀释双过滤的方法能从胆汁及结石中分离培养出纳米细菌;透射电镜负染法、间接免疫荧光法可作为纳米细菌鉴定的金标准,茜素红钙染色、PCR法可作为重要参考。
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