作者：李书剑; 唐北沙; 赵国华; 张如旭; 夏昆; ...腓骨肌萎缩症热休克蛋白b8细胞相对活力四甲基偶氮唑蓝比色法
摘要：目的探讨轴索型腓骨肌萎缩症2L（axonal Charcot—Marie-Tooth disease type 2L，CMT2L）K141N突变的热休克蛋白B8（heat shock protein B8，HSPB8）对细胞相对活力的影响。方法应用脂质体转染技术，将野生型HSPB8（wtHSPB8）和K141N突变型HSPB8（K141NHSPB8）分别转染SHSY-5Y细胞，使其过量表达上述蛋白，以表达绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）为阴性对照，转染24h后用44℃致死性热休克处理40min，用四甲基偶氮唑蓝（methylthiazolyl tetrazolium，MTT）比色法检测SHSY-5Y细胞的相对活力。结果未处理组pEGFP-wtHSPB8与pEGFP-K141NHSPB8组间吸光度值比较P〉0．05，而热休克处理组pEGFP1-W1HSPB8与pEGFP-k141NHSPB8组间吸光度值比较P〈0．05，表明热休克处理后各组细胞相对活力差异有统计学意义，热休克处理后过表达wtHSPB8的SHSY-5Y细胞活力最高，过表达K141NHSPB8的细胞次之，过表达GFP空载体的细胞活力最低。结论证实了HSPB8在细胞受到致死性热休克刺激时对于保护细胞活力方面起着重要作用，K141N突变型HSPB8对细胞相对活力的保护作用较野生型HSPB8减弱。
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