作者：杜娟; 林戈; 乜照燕; 卢光琇新基因特异表达人类胚胎干细胞克隆正常组织类es细胞计分分化细胞内含子真核表达系统
摘要：目的克隆一个人类胚胎干细胞特异表达的新基因并对其特性进行分析.方法从一个在人类胚胎干细胞(embryonic stem,ES)中特异表达的表达序列标签CF948547出发,应用生物信息学方法和分子生物学技术克隆一个新基因,采用逆转录-聚合酶链反应分析新基因的表达谱,并应用增强型绿色荧光蛋白真核表达系统分析新基因的亚细胞定位.结果成功克隆了一个新基因 HPESCRG1,GenBank登录号为AY283672.该基因cDNA长1395 bp,包含9个外显子和8个内含子,开放阅读框为250～1146 bp,定位在3q13.13,预测编码297个氨基酸,预计分子量为33 784,等电点为9.35.其编码蛋白有一个SAP功能域,该蛋白定位在细胞核内.该基因仅在人类ES细胞中表达,而在其分化细胞不表达,在人胚胎成纤维细胞、人间充质干细胞、成人和流产胚胎的多种正常组织中不表达.结论 HPESCRG1基因是一个人类ES细胞中表达特异性新基因,很可能与人类ES细胞的自我更新和维持其未分化状态密切相关.
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